ccc515.com 李斯特氏菌显色培养基旨趣和使用设施

一、单增李斯特氏菌简介: ccc515.com

  单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)简称单增李斯特氏菌,平凡漫步于当然界中,如泥土、水、浑水和陈腐的植被中齐有被发现,很容易混浊食物,引起东说念主的食物中毒。说明已发表的文件数据,可从巴氏杀菌奶、干酪、煮熟待吃的甲壳类、熏制的海鲜、三明治、簇新生果和蔬菜及生贝类中检出。由于单增李斯特氏菌在低温条款下,不错慢慢养殖,是以也可从冰激凌等冷冻食物中检出。因此,在食物卫生微生物教师中,必须加以爱重。

二、李斯特氏菌显色培养基教师旨趣:

  《GB 4789.30-2016 食物安天下度措施 食物微生物学教师 单核细胞增生李斯特氏菌教师》中,李斯特氏菌显色培养基为必选的继承性分离和计数培养基。

  李斯特氏菌显色培养基是青岛高技术工业园海博生物时代有限公司研制,可快速检测食物和药品中单增李斯特氏菌。卵白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠保管渗入压,琼脂是凝固剂,氯化锂扼制革兰氏阴性菌孕育,抑菌剂扼制除李氏菌外的革兰氏阳性菌孕育。说明单增李斯特氏菌孕育代谢产生其专有葡萄糖甘酶及酯酶的特征,在培养基中加入相应的酶显色底物,单增李斯特氏菌在该培养基上孕育,产生专有的菌落花样:菌落呈蓝绿色,其周围有一不透明环,从而使单增李斯特氏菌得到分离辨别。

三、培养基配方:

  基础培养基(g/L):

麻豆 孤注一掷

李斯特氏菌添加剂6.0 g、李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1 mL*5支

  ※ 此配方不错进行阅兵或增多养分成份以赢得最好的限制。

四、施行设施:

  1. 配制培养基:称取基础培养基14.2 g加入180 mL蒸馏水,加热熔解并不断搅动;另取1.2 g李斯特氏菌添加剂,加入20 mL无菌水,并加入一些玻璃球,不断振动1-2 min,使其夹杂均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15 min。冷至50℃摆布时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为2-3 mm,这么故意不雅察不透明环。

  使用前,把制备好的培养基摒弃室温10-20分钟。

  2. 按SN措施、GB措施、FDA措施、ISO措施或其它措施制备样品液;

  3. 把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和Half-Fraser增菌液按照1:10的比例混匀,30℃培养24小时;或其它增菌液中增菌培养;

  4. 取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上,36℃±1℃培养24-48小时。

五、施行限制判断:

  接种以下质控菌株,摒弃37℃需氧培养24-48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

参比或计

数培养基

设施

质控

限制

其他特征

单增李斯特氏菌

ATCC19115

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

蓝绿色菌落,带白色晕环

英诺克李斯特氏菌

ATCC33090

/

/

定性

/

蓝绿色菌落,无白色晕环

西尔李斯特氏菌

/

/

/

定性

/

蓝绿色菌落,无千里淀环

绵羊李斯特氏菌

/

/

/

定性

/

蓝绿色菌落,有千里淀环

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

/

半定量

G≤1

/

鼠伤寒和尚氏菌

ATCC14028

/

/

半定量

G≤1

白色小菌落

粪肠球菌

ATCC29212

/

/

半定量

G≤1

/

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

/

/

半定量

G≤1

/

黑曲霉

ATCC16404

/

/

半定量

G≤1

/

 

图1 质控菌株在李斯特氏菌显色培养基上的孕育情况

注:A:单增李斯特氏菌ATCC 19115;B:英诺克李斯特氏菌ATCC 33090;C:西尔李斯特氏菌ATCC 35967;D:绵羊李斯特氏菌ATCC 19119;E:大肠埃希氏菌ATCC 25922;F:鼠伤寒和尚氏菌ATCC 14028;G:粪肠球菌ATCC 29212;H:金黄色葡萄球菌ATCC 25923;I:黑曲霉ATCC 16404;

六、诠释:

  李斯特菌属的菌在此培养基上齐是蓝绿色菌落,但只消单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌蓝绿色菌落周围有一层晕圈。单增李斯特氏菌与绵羊李斯特氏菌不错通过溶血环大小得到分歧。因此,李斯特氏菌显色培养基后果明显优于PALCAM等传统培养基。

七、宝贵事项:

  1. 贮存:制备好的固体平板保存于2-8℃,应幸免爽快平直映照。干燥培养基应摒弃于暗澹干燥处,保存温度2-8℃。

  2. 失效:干燥培养基逾越保质期、结块和神采变化齐不行使用。

  3. 严格按照标签诠释进行配制培养基,幸免夹杂时培养基和添加剂温渡过高导致平板出现絮状物。

有关视频:

具体制备设施请参考李斯特氏菌显色平板的制备视频 点击查抄

有关措施:

GB 4789.30-2016 单核细胞增生李斯特氏菌教师 点击下载

有关家具:

李斯特氏菌显色培养基-点击查抄家具细目

注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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